法国生物梅里埃
食品微生物快速解决方案(1)
mini VIDAS+VITEK 2COMPACT+TEMPO
一：致病菌检验现状
在食品检测中，常见的细菌性病原微生物有：1、致病性大肠杆菌（特别是出血性大肠杆菌O157：H7）；2、沙门氏菌属；3、致病性弧菌（包括：霍乱弧菌、副溶血性弧菌）；4、金黄色葡萄球菌及其肠毒素；5、近年来发现致病的微生物越来越多，包括猪链球菌、坂崎肠杆菌、单核增生李斯特菌、炭疽杆菌、空肠弯曲菌……等等。
因此，包括上述致病菌在内的致病微生物的快速检验，对早日弄清病因，控制疫情，提高对公共卫生及产品质量突发事件的处理及预防水平非常重要。
致病菌常规检验方法大致是：
其中，增菌是不可缺少的步骤。
（1）如果在增菌后能够利用自动化仪器对标本进行快速筛检，就可以尽快发现在哪些标本中可能存在致病菌，可能存在哪些致病菌，从而可大大缩小检验范围，集中人力物力检验可疑标本和可疑致病菌。
（2）由于大多数细菌目前没有血清试剂，而传统生化鉴定试验周期长，操作繁琐，试剂质量无法保证，严重影响了致病菌确认工作。
（3）从选择性分离培养的培养基上挑选可疑菌落需要丰富的经验，存在漏检的可能。
（4）葡萄球菌肠毒素热稳定性很高，加工后的食物虽然检不出金黄色葡萄球菌，但仍有可能存在葡萄球菌肠毒素，而肠毒素的常规检验方法需要做动物实验，难度大，周期长。
鉴于上述原因，我们提出应用“全自动荧光免疫分析仪（mini VIDAS）+ 全自动细菌鉴定系统（VITEK 2COMPACT）+ 全自动微生物定量分析系统（TEMPO）”的快速检验方案如下：
二：致病菌快速检验系统建议方案
（1）检验流程
（2） 方案由以下三部分构成：
（a）全自动荧光免疫分析仪（mini VIDAS）
（b）全自动细菌鉴定系统（VITEK 2COMPACT）
（c）全自动微生物定量分析系统（TEMPO）
（3）方案能达到的效果
- ■ 葡萄球菌肠毒素：从标本处理到上机检测只需1小时。
- ■ 大肠杆菌O157、沙门氏菌、李斯特菌、空肠弯曲菌的检验：在增菌后1小时内即可完成筛检试验，从而缩小检验范围、明确检验对象、提高总体检验速度。
- ■ 大肠杆菌、沙门氏菌、志贺氏菌、霍乱弧菌、副溶血弧菌、坂崎肠杆菌等革兰氏阴性杆菌的生化鉴定时间缩短到2-6小时。
- ■ 链球菌（包括猪链球菌1型、2型）、葡萄球菌、各种李斯特菌等的革兰氏阳性菌鉴定时间缩短到2-8小时
- ■ 酵母样真菌、芽孢杆菌（包括炭疽芽孢杆菌）等鉴定时间缩短到15-18小时。
- ■ 奈瑟氏、嗜血杆菌、弯曲菌等苛养菌的鉴定时间缩短到6小时。
- ■ 可方便、准确、快速地开展衣原体等五十多项致病微生物的快速筛检。
- ■ 能对常规微生物检验工作中600多种致病菌的快速鉴定（2-6小时）。
- ■ 大肠菌群计数（24小时）；大肠杆菌计数（24小时）；金黄色葡萄球菌计数（24小时）；需氧嗜温菌总数（48小时）等；
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三：性能简介
¤ 用mini VIDAS快速筛检致病微生物
mini VIDAS主要用于快速筛检标本中可能存在的病原微生物。
1：应用原理
试剂盒吸附针的内壁上包被有特异的抗体，应用酶联免疫法检测抗原（细菌、蛋白），最后检测蓝色荧光（ELFA），其荧光值与标本中抗原的含量成正比。
2：检测项目
（1）食品微生物(李斯特菌属、单核增生李斯特菌、弯曲菌属、大肠杆菌O157、沙门氏菌属、葡萄球菌肠毒素检测，沙门氏菌免疫浓缩、大肠杆菌O157免疫浓缩)八项。
（2）人血清免疫项目(包括爱滋病)，人致病性寄生虫、病毒项目，激素类，其它免疫项目等共五十多项
3：工作容量
（A）设两个相互独立工作的检测仓，可同时进行12个相同或不同的测试。
（B）每天可进行约60—80项测试。
4：附件、配件：机电一体化设计，内置微电脑、控制键盘、打印机，无须任何配件、附件。
5：技术优势
（A）简单快速：
- ■ VIDAS试条即可使用，有条码标记，只加样无须配置任何试剂；
- ■ 按一个键即可自动完成全部分析操作过程并自动打印报告；
- ■ 标本增菌后不需分离培养，即可上机检测，仪器运行几十分钟后自动打印报告，阴性结果，表明标本不含目标微生物，只需将阳性标本的增菌肉汤做分离培养，可大大缩小检验范围，并使检验目标明确。
- ■ 机电一份化设计，检测仓、计算机、荧屏、键盘及打印机合为一体，无须任何配件、附件；
- ■ 使用、维护简便。
（B）结果准确
- ■ 应用免疫夹心方法，对每个标本做两次免疫反应，大大提高检测的特异性，从而保证检测结果的可靠性。
- ■ 特大固相吸附表面积，提高免疫捕获的数量，灵敏度高。
- ■ 采用荧光检测方法，灵敏度比可见光方法高出1000倍。
- ■ 上述三项技术有力地保证了检测的灵敏性。
- ■ 获美国食品及药物管理局（FDA）、日本厚生省、AOAC（国际公职分析家协会）、USDA（美国农业管理局）、AFNOR（法国）、DANVAL（丹麦）、EMMAS（英国）、加拿大、德国、中国（GB）等政府及权威机构认可。
（C）安全可靠
- ■ 应用ELISA技术，最后测蓝色荧光（ELFA）；
- ■ VIDAS试条直接使用的设计，去除所有污染的可能性；
- ■ 内设自检系统，无管道，无须清洁，无交叉污染；
（D）稳定性高
- ■ 仪器14天内只需做一次质控；
- ■ 试剂有效期长达一年。
¤ 用VITEK 2 COMPACT鉴定可疑致病
（1）检测方法：
应用了微生物数值编码鉴定技术、微生物快速生化反应技术、反应结果动态检测技术，以先进的三波长显色法每15分钟自动对每个样本检测一次反应结果，并自动进行数据处理、结果报告及资料备份。
（2）适用范围
适用于医疗疾病预防与控制、、卫生、动物防疫、检验检疫、大专院校、科研院所等单位的较大型实验室进行细菌鉴定、药敏试验。
（3）检测项目
- ■ 兰氏阴性杆菌鉴定（GN鉴定卡，包括非发酵菌）
- ■ 革兰氏阳性菌鉴定（GP鉴定卡，包括7种李斯特菌）
- ■ 酵母菌鉴定（YST鉴定卡）
- ■ 需氧芽胞杆菌鉴定（BCL鉴定卡，包括炭疽芽孢杆菌）
- ■ 奈瑟菌、嗜血杆菌鉴定（NH鉴定卡，包括弯曲菌）
- ■ 厌氧菌鉴定（ANC鉴定卡）
- ■ 革兰氏阴性菌药敏试验
- ■ 革兰氏阳性菌药敏试验（GPS系列）
（4）设备硬件
- ■ VITEK 2 COMPACT主机
- ■ 资料工作站
- ■ 打印组件
- ■ UPS
- ■ 稳压器
- ■ 数字显示电子比浊器
（5）软件
- ■ 操作系统：Windows XP
- ■ 应用软件：微生物鉴定/药敏系统软件；药敏专家系统软件；自建数据库软件
（6）系统性能
- ■ 高度自动化：联机孵育、定时扫描、自动加样，减少人为差错和误差。
- ■ 结果准确，获美国药品食品管理局（FDA）认可、中国GB认可等。
- ■ 检测速度快：对各种菌鉴定的时间为2－18小时，绝大多数细菌的鉴定可在2－6小时内得出结果。
- ■ 设计先进，适应性强：所有软件资料可随着实验微生物的发展及人类认识水平的提高而由厂方随时免费更新，能不断扩容，有广泛的应用范围。
- ■ 安全卫生：密闭式试剂卡，避免菌悬液洒出的可能性，可防止菌悬液被空气中的杂菌污染。
（7）强大的数据处理功能：
- ■ 该系统不仅能对大量检测数据自动地进行高效的处理，同时，也能自动备份，以保护资料不会丢失。
- ■ 该系统具有统计功能
- ■ 具有专家系统自动地对检验结果进行处理，若与基本医学原理相矛盾，或是罕见情况，或是未知微生物，系统会做出提示，要求做进一步的实验。
- ■ 能与单位的中心计算机联结起来，成为计算机网络的一个组成部分，从而能随时向有关科室提供有关的微生物学检验报告。
（8）环境及电力要求
- ■ 环境要求：
- ■ 温度：18—28℃
- ■ 湿度：≤85%
- ■ 电力要求：
- ■ 220V，50Hz,15A。电力供应不稳定，经常停电时应配备大型蓄电池。
¤用TEMPO快速定量分析
TEMPO应用于快速对食品卫生指标进行定量分析。
（1）性能及用途：TEMPO具有检测速度快（24小时内）、检测灵敏度高、快速定量检测致病菌（细菌总数、大肠菌群、大肠杆菌、粪大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、霉菌/酵母等）等特点。符合所有营养与食品卫生科保健食品微生物指标的定量检测；应对公共卫生突发事件、食物中毒、食源性致病菌快速准确的定量检测要求的唯一相关产品。
（2）检测方法：
依据MPN原理，封闭包装以16管的形式改良成一个单独的、最小化的卡片,内含不同大小48个反应孔；通过检测荧光，根据阳性孔数目计算MPN，以CFU/g报告。
（3）检测项目
- ■ 细菌总数 Total Count （24H）
■ 大肠杆菌 E. Coli（24H）
- ■ 大肠菌群 Total Coliforms（24H）
■ 粪大肠杆菌 Faecal Coliforms（24H）
- ■ 金黄色葡萄球菌Staphylococcus Aureus（24H）
- ■ 肠杆菌科 Enterobacteriaceae（24H）
■ 酵母/霉菌 Yeast / Mold （48H）
（4）设备硬件
- ■ 样本准备站
- ■ 读卡站
- ■ 扫描器
- ■ 充填盘
- ■ 数据处理终端
- ■ 打印系统
（5）环境及电力要求
（A）电源要求：
- ■ 输入电压: 220/ 240V
- ■ 输入电流: 2.0 安培
- ■ 频率：: 50 to 60 Hz + /- 5%
（B） 环境要求：
- ■ 温度: 15-30ºC
- ■ 湿度: 20%-80% RH, 无凝结水
四：权威性：本方案产品已经得到了全球微生物检验权威机构的验证和认可，包括美国食品及药物管理局（FDA）、日本厚生省、AOAC（国际公职分析家协会）、USDA（美国农业管理局）、AFNOR（法国）、DANVAL（丹麦）、EMMAS（英国）、加拿大、德国、中国国标（GB）等权威认证，结果准确。
相关认证见下表：
A：国家认证
- ■ 国家标准GB/T4789.9-2008 食品卫生微生物学检测 空肠弯曲菌检验
- ■ 国家标准GB/T4798.30-2008 食品卫生微生物学检测 单核细胞增生李斯特氏菌检验
- ■ 国家标准GB/T4789.36-2008 食品卫生微生物学检测 大肠埃希氏菌O157:H7/NM检验
- ■ 国家标准GB/T4789.22429-2008 食品中沙门氏菌、肠出血性大肠埃希氏菌O157及单核细胞增生李斯特氏菌的快速筛选检验 酶联免疫法
- ■ 国家标准GB/T4789.4-2008 食品卫生微生物学检验 沙门氏菌检验
- ■ 国家标准GB/T4789.7-2008 食品卫生微生物学检验 副溶血性弧菌检验
- ■ 国家标准GB/T4789.8-2008 食品卫生微生物学检验 小肠结肠炎耶尔森氏菌检验
- ■ 国家标准GB/T4789.40-2008 食品卫生微生物学检验 阪崎肠杆菌检验
B：国际认证
- ■ AOAC国际认证 （沙门氏菌、单核增生李斯特氏菌、李斯特氏菌、大肠埃希菌0157、葡萄
- ■ 球菌肠毒素等）
- ■ AFNOR认证 （沙门氏菌、单核增生李斯特氏菌、李斯特氏菌、大肠埃希菌0157）
- ■ DGAL官方方法（大肠埃希菌0157）
- ■ NORVAL认证 （沙门氏菌）
- ■ EMMAS认可 （沙门氏菌、李斯特氏菌）
- ■ 加拿大政府认可 （沙门氏菌、单核增生李斯特氏菌、李斯特氏菌）
- ■ 德国DIN委员会认可（沙门氏菌、单核增生李斯特氏菌、李斯特氏菌）
- ■ 日本政府认可 （大肠埃希菌0157）
五：生产商及代理商简介：
- ■ 法国生物梅里埃公司是一家集研究、生产生物制品、自动化检验仪器的专业公司，在世界各地设有二十多家分公司，其产品种类繁多，仅用于食品微生物检验的产品就有数百种，包括手工试剂、半自动及全自动仪器。其产品覆盖了从细菌的增菌、快速筛检、分离增养、染色镜检、生化鉴定及基因分型等全过程。生物梅里埃产品进入中国市场已经有20多年历史，工业产品在国内微生物检测市场上有85%以上，主要为我国检验检疫、卫生防疫、质量检验、畜牧兽医、水产出口企业及水产技术站、高校研究所、制药企业、其它食品加工厂及医疗等机构微生物实验室服务。生物梅里埃（中国）有限公司拥有数十名微生物临床及工业领域专业人员和工程技术人员，拥有丰富的检验经验和仪器维修经验，全面负责生物梅里埃公司产品在中国市场的安装、维护及保养，以及用户的培训及技术支持，为用户提最完善的售后服务。
- ■ 海南金田生物科技有限公司是一家专业代理进口实验室仪器及通用耗材的供应商。公司自创业以来，始终秉承“客户至上、服务第一、诚信经营、求实创新”的理念，积极进取，赢得广大客户的普遍认同和支持，享有良好的声誉。作为法国生物梅里埃（非临床）产品海南总代理商，海南金田生物科技有限公司致力于生物梅里埃产品在海南工业市场的推广、调研、销售、技术支持及售后服务等工作，为海南省范围内相关微生物检验机构及企业提供生物梅里埃优质的产品、专业的技术支持和完善的售后服务等。
六：技术培训、售后服务
- ■ 学术研讨会：生物梅里埃(中国)有限公司将经常性地组织有关学术活动，给我国食品微生物检验界介绍国外的先进技术，届时，我们将邀请有关用户参考技术交流活动。
- ■ 安装调试及培训工作：生物梅里埃(中国)有限公司产品工程师免费提供上门安装、调试及培训，直到用户满意。
- ■ 免费升级最新软件：生物梅里埃公司终身免费提供上门升级最新软件，保证检测结果的准确性。
- ■ 消耗品供应：海南金田生物科技有限公司将保质、保量、准确地为海南地区生物梅里埃用户提供生物梅里埃专用消耗品及食品微生物检验用的相关材料。
法国生物梅里埃工业微生物检测产品：
| ■ Mini VIDAS全自动荧光免疫分析仪 |
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用于致病微生物快速检测； |
| ■ TEMPO全自动食品微生物定量分析仪 |
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用于卫生指标的快速检测； |
| ■ VITEK全自动细菌鉴定仪 |
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快速微生物鉴定（全自动） |
| ■ ATB自动细菌鉴定仪 |
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快速微生物鉴定（自动） |
| ■ API 国际标准细菌鉴定系 |
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快速微生物鉴定（手工） |
